抗體蛋白質測序只是簡單地定義未知抗體的氨基酸序列。 在抗體蛋白的從頭測序中使用質譜法使得在沒有可用的細胞系或事先知道 DNA 序列的情況下執(zhí)行此操作成為可能。
蛋白質分子的質譜測量作為測序技術的基礎,它只需要0.2毫克的蛋白質。分析和報告之間的時間已縮短至數周。詳細報告包括重鏈和輕鏈序列、支持報告序列的相關數據以及對蛋白質分子的其他評論。
對抗體使用從頭測序的好處包括:
如果產生特定抗體的雜交瘤丟失或不可用,抗體本身仍然可以通過重組復制,只需使用 0.2 mg 單克隆抗體蛋白。如果連這么多都沒有,可能還有其他辦法。
使用具有優(yōu)化設置的高分辨率質譜技術 ,以及用于抗體從頭測序的專有軟件,意味著可以對整個蛋白質從 n-term 到 c-term 進行測序,包括每個氨基酸。
由于在單獨肽的多個質譜讀數中獲得了強信號峰特征,因此可以正確識別序列中的每個氨基酸。
基于質譜的技術可用于測序所有類型的抗體,無論是 IgA、IgM、IgG、IgY、Fab、ScFv 等,來自所有類型的動物物種,包括小鼠、大鼠、兔子和倉鼠,除了來自人類。 它甚至已被用于對受污染或結合的抗體或成對具有不同輕鏈的抗體進行測序。
該技術的目標是完美的質譜蛋白質測序。 這導致人們不斷努力生產優(yōu)化的工作流程和軟件,以便對每種蛋白質進行測序,無論多么困難,并保持最高質量標準。
這種抗體從頭測序的使用通常會導致檢測到測序中的意外差異或蛋白質分子上的新糖基化位點,而 DNA 測序無法檢測到這些差異。
用于從頭抗體測序的質譜方法僅適用于等待測序的一個或數百個抗體分子。
在典型情況下,該技術需要 0.2 mg 或更多純度至少為 95% 的單克隆抗體。 分析后,可交付成果包括一份詳細的報告,其中給出了重鏈和輕鏈的完整序列,以及支持結果的相關數據,以及任何其他有用的評論,例如觀察抗體的意外變化。 所需時間通常為收到樣品后 1-2 周。
輝駿生物是抗體蛋白質測序技術的領導者,團隊專注于基于質譜的蛋白質組學領域,開發(fā)了無需訪問生產細胞系即可直接對抗體蛋白質進行測序的技術。 輝駿生物抗體蛋白測序服務可在常規(guī)基礎上對任何給定的抗體蛋白進行準確測序,保證100%測序準確度,對輕鏈的測序誤差范圍在+/-1.2Da,對重鏈的誤差范圍在+/-1.8Da,保證交付抗體活性,不成功不收費。
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