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蛋白質(zhì)間相互作用是其發(fā)揮功能的主要模式,蛋白質(zhì)通過結(jié)合不同的伙伴來行駛不同功能,形成復雜的信號網(wǎng)絡。免疫共沉淀(Co-IP)、pull down、熒光共定位等都是最常見的蛋白互作研究方法。輝駿生物的合作伙伴——中山大學腫瘤中心華南腫瘤學國家重點實驗室在Cancer Research(1區(qū),IF=12.5)上發(fā)表的論文,就同時采用了Co-IP和GST pull down方法,研究了糖原合成酶2(GYS2)在乙肝病毒相關性肝癌中的機制。
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RNA pulldown探針制備先確定目標序列,根據(jù)實驗目的確定合適的RNA序列,可以是目標轉(zhuǎn)錄本的全部序列或部分序列,對照組通常采用反義序列,也可以是無關序列.如果目標序列小于100bp,建議直接合成帶標記的RNA,如果大于100bp,可按照輝駿生物提供的步驟體外轉(zhuǎn)錄獲得.為解決RNA探針標記的難題,輝駿生物研發(fā)了一種新的標記方法,利用一段只有16nt的RNA標簽“F2”來標記RNA,100%標記,操作簡單,成本低
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RNA pulldown用于檢測RNA-蛋白質(zhì)、或RNA-RNA之間相互作用的技術(shù),其基本原理是:利用帶標簽的目標RNA探針與待測蛋白質(zhì)或RNA進行體外或體內(nèi)結(jié)合,通過親和作用將復合物分離出來,之后采用Western Blot、質(zhì)譜技術(shù)檢測結(jié)合蛋白或采用qPCR、測序技術(shù)檢測結(jié)合RNA。輝駿生物研發(fā)了一種新的標記方法,利用一段只有16nt的RNA標簽“F2”來標記RNA,再采用與F2具有強大親和力的配體磁珠捕獲互作復合體。這種標記方法可用于標記各種類型的RNA(lnRNA、mRNA、circRNA、pre-miRNA或pri-miRNA),操作簡單、成本低。
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難道沒有完全無污染的抗體beads嗎?當然有!結(jié)合多年的互作實驗和質(zhì)譜經(jīng)驗,輝駿生物開發(fā)了專門解決輕重鏈污染問題的ChainFree?標簽抗體磁珠,涵蓋了目前主流的多種標簽,比如Flag、HA、Myc、V5、GFP、mCherry。該磁珠上偶聯(lián)了經(jīng)過嚴格篩選、優(yōu)化并重組表達的無輕、重鏈的標簽抗體,完全解決了抗體污染問題
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輝駿生物可提供rip、rip seq、rip qpcrS實驗,價格低 周期短,可對圍繞RNA結(jié)合蛋白開展的整體課題提供全方位方案建議.RIP/RIP-seq或RNA免疫沉淀/RNA免疫沉淀測序是一種高通量實驗技術(shù),用于研究RNA和RNA結(jié)合蛋白之間的相互作用。它允許識別細胞或組織內(nèi)的特定RNA結(jié)合蛋白。
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蛋白測序主要是依靠化學或酶消化的方法來分離多肽并檢測氨基酸殘基的數(shù)量和組成,輝駿生物可對多種蛋白樣品提供蛋白質(zhì)測序,蛋白從頭測序等服務,輝駿基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設備,結(jié)合自主研發(fā)的測序技術(shù)平臺,能夠?qū)崿F(xiàn)對目標蛋白氨基酸序列的精準解讀.該技術(shù)可以用于解析任何純蛋白樣本,比如工具酶、突變蛋白、單克隆抗體等
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蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析是指在蛋白質(zhì)研究和表征中使用質(zhì)譜分析,包括蛋白質(zhì)的定量、分析、相互作用圖譜以及翻譯后修飾的鑒定。 蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析也可稱為基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學。 基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學由三種方法組成:自上而下、中下和自下而上的蛋白質(zhì)組學。
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輝駿生物提供抗體測序技術(shù)服務,抗體從頭測序服務,單克隆抗體從頭測序服務,蛋白質(zhì)測序,抗體解析,抗體表達等多類抗體實驗外包基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設備,結(jié)合自主研發(fā)的測序技術(shù)平臺,實現(xiàn)對抗體氨基酸序列的精準解讀。同時,我們有自建的高通量表達驗證平臺,能夠?qū)σ褱y得的抗體序列進行高通量表達驗證,從而保證交付抗體的活性。蛋白質(zhì)測序最有用的應用之一是確定抗體序列。有爭議的是,蛋白質(zhì)測序是目前可用于闡明抗體編碼的最合適的技術(shù)。特別是重新蛋白質(zhì)測序是抗體測序的完美應用,因為它避免了基于同源性的數(shù)據(jù)庫搜索中的隨機或偏倚引入。
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抗體基因座包含各種基因片段,這些基因片段在發(fā)育中的B細胞中重新排列以產(chǎn)生高度可變的抗體庫。輕鏈可變區(qū)(LC)由兩個基因片段組裝而成,一個長可變(V)片段和一個短連接(J)片段。重鏈(HC)可變區(qū)由V區(qū)段、J區(qū)段和多樣性(D)區(qū)段組裝而成。
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BLAST是生命科學研究中常用的一套在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫或核酸數(shù)據(jù)庫中進行序列相似性比對的一套分析工具。英文全稱是Basic?Local?Alignment?Search?Tool。NCBI作為生命科學研究領域使用最為廣泛的數(shù)據(jù)庫之一,深受廣大科研工作者青睞。輝駿生物給大家簡單介紹一下NCBI上的blast比對。
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抗體或免疫球蛋白(Ig)保持共同組成的四級結(jié)構(gòu)兩個相同的重鏈(高碳鋼)和兩個相同的輕鏈(LCs)。 結(jié)構(gòu)heterotetrameric與二硫橋連接高碳鋼和LCs在一起形成規(guī)范化免疫球蛋白“Y”的形狀。變量域(V)的重型和輕型鏈(VH和VL分別產(chǎn)生抗原特異性通過高度可變的氨基酸序列。 V域與抗原相互作用時,恒域(C)在重型和輕型鏈相互作用效應和分子的蛋白質(zhì)。 高碳鋼有三個常數(shù)區(qū)域,與一個在LCs,屈指可數(shù)的n端來糖基(CH1,CH2,CH3)
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SILAC實驗技術(shù)于2002年首次引入,作為南丹麥大學實驗生物信息學中心 (CEBI) 的一種代謝標記技術(shù)。在活細胞的生長培養(yǎng)基中使用了穩(wěn)定的同位素標記的氨基酸,隨后可以對不同實驗條件下的細胞蛋白質(zhì)組學進行廣泛比較。輝駿生物SILAC定量蛋白質(zhì)組學實驗技術(shù)服務擁有10多年豐富經(jīng)驗;公司自有蛋白質(zhì)組學平臺,silac蛋白質(zhì)譜分析外包代作價格低,已幫助眾多科研者發(fā)表高分文獻。